1.Apakah itu kultur sel?
Kultur sel merujuk kepada penyingkiran sel daripada haiwan atau tumbuhan dan kemudian membesarkannya dalam persekitaran buatan yang baik.Sel-sel boleh diambil terus dari tisu dan dipecahkan dengan cara enzimatik atau mekanikal sebelum dikultur, atau ia boleh diperoleh daripada garisan sel atau garisan sel yang telah ditetapkan.
2.Apakah budaya primer?
Kultur primer merujuk kepada peringkat kultur selepas sel dipisahkan daripada tisu dan membiak dalam keadaan yang sesuai sehingga mereka menduduki semua substrat yang ada (iaitu mencapai pertemuan).Pada peringkat ini, sel mesti disubkultur dengan memindahkannya ke bekas baru dengan medium pertumbuhan segar untuk menyediakan lebih banyak ruang untuk pertumbuhan berterusan.
2.1 Talian sel
Selepas subkultur pertama, budaya utama dipanggil garisan sel atau subklon.Garisan sel yang diperoleh daripada kultur primer mempunyai jangka hayat yang terhad (iaitu terhad; lihat di bawah), dan apabila ia berlalu, sel dengan kapasiti pertumbuhan tertinggi mendominasi, menghasilkan tahap genotip tertentu dalam populasi yang konsisten dengan fenotip.
2.2 Ketegangan sel
Jika subpopulasi garis sel dipilih secara positif daripada kultur melalui pengklonan atau kaedah lain, garisan sel akan menjadi ketegangan sel.Strain sel biasanya memperoleh perubahan genetik tambahan selepas garis ibu bapa bermula.
3. Talian sel terhad dan berterusan
Sel normal biasanya membahagi hanya beberapa kali sahaja sebelum kehilangan keupayaan untuk membiak.Ini adalah peristiwa yang ditentukan secara genetik yang dipanggil penuaan;garisan sel ini dipanggil garisan sel terhingga.Walau bagaimanapun, beberapa garisan sel menjadi abadi melalui proses yang dipanggil transformasi, yang boleh berlaku secara spontan atau boleh disebabkan oleh bahan kimia atau virus.Apabila garisan sel terhingga mengalami transformasi dan memperoleh keupayaan untuk membahagi selama-lamanya, ia menjadi garisan sel berterusan.
4. Keadaan budaya
Keadaan kultur setiap jenis sel adalah sangat berbeza, tetapi persekitaran buatan untuk mengkultur sel sentiasa terdiri daripada bekas yang sesuai, yang mengandungi perkara berikut:
4.1 Substrat atau medium kultur yang membekalkan nutrien penting (asid amino, karbohidrat, vitamin, mineral)
4.2 Faktor pertumbuhan
4.3 Hormon
4.4 Gas (O2, CO2)
4.5 Persekitaran fizikal dan kimia terkawal (pH, tekanan osmotik, suhu)
Kebanyakan sel bergantung kepada penambat dan mesti dibiakkan pada substrat pepejal atau separa pepejal (kultur melekat atau monolayer), manakala sel lain boleh tumbuh terapung dalam medium (kultur ampaian).
5.Cryopreservation
Jika terdapat lebihan sel dalam subkultur, ia harus dirawat dengan agen pelindung yang sesuai (seperti DMSO atau gliserol) dan disimpan pada suhu di bawah -130°C (cryopreservation) sehingga ia diperlukan.Untuk maklumat lanjut tentang subkultur dan pengawetan sel.
6. Morfologi sel dalam kultur
Sel dalam kultur boleh dibahagikan kepada tiga kategori asas berdasarkan bentuk dan rupanya (iaitu morfologi).
6.1 Sel fibroblas adalah bipolar atau multipolar, mempunyai bentuk yang memanjang, dan tumbuh melekat pada substrat.
6.2 Sel-sel seperti epitelium adalah poligon, mempunyai saiz yang lebih teratur, dan dilekatkan pada matriks dalam helaian diskret.
6.3 Sel seperti limfoblast adalah sfera dan biasanya tumbuh dalam ampaian tanpa melekat pada permukaan.
7.Aplikasi kultur sel
Kultur sel adalah salah satu alat utama yang digunakan dalam biologi sel dan molekul.Ia menyediakan sistem model yang sangat baik untuk mengkaji fisiologi normal dan biokimia sel (seperti penyelidikan metabolik, penuaan), kesan ubat-ubatan dan sebatian toksik pada sel, dan kesan mutagenesis dan karsinogenik.Ia juga digunakan untuk pemeriksaan dan pembangunan ubat dan pembuatan sebatian biologi secara besar-besaran (seperti vaksin, protein terapeutik).Kelebihan utama menggunakan kultur sel untuk mana-mana aplikasi ini ialah ketekalan dan kebolehulangan hasil yang boleh diperolehi menggunakan sekumpulan sel klon.
Masa siaran: Jun-03-2019